faqe_baner

Vlera sasiore Ct e zbulimit të fluoreshencës së acidit nukleik - një parametër dashuri-urrejtje

Vlera sasiore Ct e zbulimit të fluoreshencës së acidit nukleik - një parametër dashuri-urrejtje

"Programi i Diagnostifikimit dhe Trajtimit të Pneumonisë nga Virusi i Ri Koronar (Edicioni i nëntë i provës)" përdor vlerën Ct të zbulimit të acidit nukleik ≥35 si një nga bazat e rëndësishme për çlirimin e menaxhimit ose shkarkimit të izolimit.Pra, çfarë përfaqëson vlera Ct e kompletit të zbulimit të acidit nukleik?A janë të krahasueshme vlerat Ct të kompleteve të ndryshme?Sa më e ulët të jetë vlera Ct, aq më e mirë është performanca e kompletit?
Vlera Ct (Cikli i Pragut, Ct) është numri i cikleve PCR kur intensiteti i sinjalit sasior të fluoreshencës së fluoreshencës në kohë reale tejkalon pragun e caktuar.Kompletet e zbulimit të acidit nukleik marrin si shembull kurorën e re.Për të njëjtin reagim të të njëjtit komplet për të zbuluar dy mostra që përmbajnë virus, A dhe B, madhësia e vlerës së Ct përfaqëson, në një masë të caktuar, numrin e kopjeve të gjenit viral, domethënë ngarkesën virale.Sa më i ulët të jetë Ct i kampionit B, aq më e lartë është ngarkesa virale.Vlera e Ct është në përpjesëtim të zhdrejtë me ngarkesën virale dhe infektivitetin e saj.Të mirat dhe të këqijat e kompleteve të ndryshme sasiore të fluoreshencës në kohë reale nuk mund të gjykohen vetëm nga madhësia e vlerës së Ct, sepse vlerat e Ct të kompleteve të ndryshme nuk janë të krahasueshme.Vlerësimi i performancës së kompletit duhet të matet nga aspektet e ndjeshmërisë (kufiri minimal i zbulimit), specifika, saktësia, qëndrueshmëria dhe aplikimi diagnostik.Secili prodhues i reagentëve ka tetëmbëdhjetë llojet e veta të arteve marciale dhe ato kanë fuqitë e tyre magjike në zbatim, kështu që nuk do të hyj në detaje këtu.
Për instrumentet/sistemet e analizës sasiore PCR (QPCR) konvencionale në kohë reale, përvetësimi i vlerave të Ct dhe përdorimi i tyre i përhapur në aplikimet e zbulimit të patogjenëve janë të njohur për të gjithë.Me zhvillimin e industrisë dhe avancimin e teknologjisë, pajisjet dhe reagentët QPCR kanë hasur në mundësi dhe sfida.Yiou Think Tank (Raporti Kërkimor 2021 mbi Industrinë e Testimit Gjenetik të Kinës: Teknologji) analizoi se shumica e kompanive në industrinë QPCR të vendit tim po përballen me probleme të zakonshme të bazuara në teknologji.Në përgjigje të këtyre problemeve, zgjidhjet ndahen kryesisht në dy lloje: përshpejtimi i përmirësimit të teknologjisë dhe vendosja e teknologjive të reja.
POCT për diagnozën molekulare QPCR është një nga drejtimet e zhvillimit të industrisë, dhe përmirësimi i performancës është një faktor i rëndësishëm për të përshpejtuar aplikimin e teknologjisë.Për pajisjet POCT me xhiro me një kampion të vetëm të QPCR, si të optimizoni vlerën Ct të parametrit kryesor të një reaksioni të vetëm në R&D?E njëjta pajisje, i njëjti sistem reagimi dhe i njëjti përqendrim shabllon, teorikisht sa më e madhe të jetë vlera Ct e një reaksioni të vetëm, aq më i ulët është efikasiteti i enzimës në reaksion.
Në procesin e përmirësimit të efikasitetit të reaksionit të enzimës dhe optimizimit të vlerës së Ct, së pari mund të analizohet një kurbë tipike e amplifikimit sasior të fluoreshencës me ciklin 40 PCR.Kurba e amplifikimit në figurën më poshtë ndahet në fazën e sfondit të fluoreshencës, fazën e amplifikimit eksponencial, fazën lineare dhe fazën e pllajës.Për të arritur një sfond me fluoreshencë më të ulët, sa më shumë që të jetë e mundur për ta dalluar atë nga vlera e fluoreshencës së amplifikimit të hershëm eksponencial, është e nevojshme të testohet nga transportuesi i materialeve harxhuese të reagimit, shqyrtimi i dizajnit të sondës së primerit dhe sistemi i tamponit të reagimit.Periudha e amplifikimit eksponencial është reagimi më i drejtpërdrejtë i aktivitetit të enzimës, dhe është gjithashtu prova e koordinimit të përsosur të pajisjeve POCT, bartësve të reagimit dhe reagentëve.Në këtë kohë, kontrolli i temperaturës së pajisjeve, marrja dhe analiza e sinjalit optik, biokompatibiliteti i bartësit dhe performanca e sistemit të reagentëve duhet të rregullohen dhe testohen në të gjitha aspektet.Më në fund, i gjithë amplifikimi përfundon dhe rezultatet duhet të paraqiten nga një algoritëm rigoroz i të dhënave për të marrë një vlerë të arsyeshme Ct.
Linja CT
Një hap i vogël në optimizimin e vlerës së Ct janë hapat e panumërt të personelit të R&D.Në ankthin dhe entuziazmin e ditës e të natës, sa herë “malet dhe lumenjtë nuk duken askund, shelgjet janë të errëta dhe lulet janë të ndritshme dhe ka një fshat tjetër”, që na jep kurajon dhe pasionin për të ecur përpara. përsëri.


Koha e postimit: 29 shtator 2022